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Hypersep固相萃取的操作步驟

更新時間:2023-02-14      瀏覽次數(shù):1240
  Hypersep固相萃取是近年發(fā)展起來的一種樣品預(yù)處理技術(shù),由液固萃取和柱液相色譜技術(shù)相結(jié)合發(fā)展而來,主要用于樣品的分離、純化和濃縮,與傳統(tǒng)的液液萃取法相比較可以提高分析物的回收率,更有效的將分析物與干擾組分分離,減少樣品預(yù)處理過程,操作簡單、省時、省力。
 
  操作步驟:
 
  1、固相萃取柱的預(yù)處理活化:
 
  用適當(dāng)?shù)娜芤簩滔噍腿≈M行預(yù)處理活化,可以展開碳?xì)滏湥黾雍湍繕?biāo)分析物作用的表面積,可以除去柱上吸附的對分析有影響的雜質(zhì),保證良好的萃取再現(xiàn)性,同時注意在上樣前預(yù)處理好的固相柱必須保持濕潤。
 
  2、 固相萃取柱的上樣:
 
  將樣品加于固相萃取柱中,用正壓或負(fù)壓使樣品通過柱子,控制好樣品的流速,對于生物樣品,一般控制在1、5 ml/min。對于以離子交換為作用機理的萃取,樣品通過固相萃取柱的速度應(yīng)該適當(dāng)?shù)慕档?,以保證分析物有足夠的時間與SPE柱填料的離子交換功能團發(fā)生充分的作用。
 
  3、固相萃取柱的淋洗:
 
  用適當(dāng)?shù)那逑慈軇┻x擇性地洗掉附著力弱的雜質(zhì)而保留目標(biāo)分析物于固相萃取柱上。清洗溶劑的選擇取決于最后的分析手段。
 
  4、 固相萃取柱的干燥:
 
  如最后的清洗溶劑為緩沖溶液或水溶性有機溶劑,而分析手段為反相HPLC,固相柱上的殘留水對分析影響不大。但是,當(dāng)洗脫劑為非水溶性有機溶劑或分析手段又為GC或GC-MS
 
  時,固相柱的干燥就顯得特別重要。
 
  5、目標(biāo)分析物的洗脫:
 
  選擇洗脫溶劑時必須考慮有足夠強度的洗脫劑,要以最小用量的洗脫劑將盡可能多的目標(biāo)分析物洗脫下來;同時還要兼顧洗脫劑必須有足夠的選擇性,選擇只將目標(biāo)分析物洗脫,而吸附力強的雜質(zhì)保留在柱上。
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